一、载玻片和盖玻片的处理 将载玻片或培养用的小盖片浸泡在重铬酸钾浓硫酸清洁液中24小时,然后流水充分冲洗,再用蒸馏水冲洗3遍以上,而后置95%乙醇中12小时。取出擦干或烤干,贮放于玻片盒内备用。盖玻片很薄,以上处理程序必须缩短时间,清洁液浸泡只需2小时,流水冲洗注意勿损伤玻片。
二、黏附剂的使用 1.多聚左旋赖氨酸(poly-1—lysine) 首先配制0.1%(ω/υ)多聚左旋赖氨酸浓缩液,室温下(18~26℃)可保存1年。使用时,将试剂10倍稀释成工作液,浓度为0.01%(ω/υ),2—8℃冰箱保存,有效期3个月。使用方法是将充分洗净和预先干燥的玻片浸泡于稀释后的多聚左旋赖氨酸溶液数十秒或提拉十次,沥干.于室温下晾干12—24小时或在45℃以下烤箱内烘干。处理后的玻片避光干燥可保存三个月。 2.APES(3—氨丙基—乙氧基甲硅烷) APES必须现用现配。用此方法黏合的玻片应垂直烤片而不能水平烤片,否则,组织片中易出现气泡。 APES的使用方法:用丙酮50倍稀释(APESl份、丙酮49份混合),将洗净的玻片放人稀释好的APES中,停留20~30秒,取出稍停,再人纯丙酮或蒸馏水中涮去未结合的APES。置通风橱中晾干即可。注意用APES防脱片处理的载玻片捞片时组织应一步到位.并尽量减少气泡存在,以免影响染色结果。注意不要将APES与其他防脱载玻片剂混合使用。
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